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Beschreibung
Die Funktionen von Biomolekülen hängen von ihrer Struktur und ihrer Wechselwirkungsdynamik mit anderen Molekülen ab. Die Messung dieser Eigenschaften einzelner Biomoleküle ist für die moderne Biologieforschung unerlässlich. Eine ideale Technik zur Durchführung dieser Beobachtungen muss alle folgenden Bedingungen erfüllen: (i) Abbildung unter physiologischen Bedingungen, (ii) hohe räumliche Auflösung, (iii) hohe zeitliche Auflösung, (iv) geringe Invasivität des Moleküls und (v) direkte Abbildung des Moleküls ohne Verwendung von Markern. Die meisten Einzelmolekülansätze, einschließlich aller derzeitigen lichtmikroskopischen oder strukturellen Methoden, beruhen auf der Markierung oder dem Einfrieren der Proben, was die natürliche Funktionalität der Biomoleküle beeinträchtigen kann. Daher steigt die Nachfrage nach Werkzeugen, die die Visualisierung der Dynamik einzelner Biomoleküle unter physiologischen Bedingungen ermöglichen, als Alternative rapide an. Die Rasterkraftmikroskopie (AFM) ist eine superauflösende markierungsfreie Technik, die die direkte Beobachtung und Charakterisierung von Biomolekülen und der Oberfläche biologischer Oberflächen unter physiologischen Bedingungen ermöglicht. Im Gegensatz zu vielen anderen Arten der Mikroskopie beruht die AFM auf einer mechanischen Interaktion mit der Probe, wobei eine scharfe Spitze verwendet wird, um die Oberflächentopografie der Probe im Nanometerbereich zu erfassen. Angesichts dieses Vorteils wird die AFM zu einer wirksamen Alternative für die Visualisierung und Quantifizierung biomolekularer Strukturen und funktioneller Dynamik auf Einzelmolekülebene. Allerdings ist das herkömmliche AFM durch seine geringe zeitliche Auflösung eingeschränkt, so dass nur statische oder langsame Zeitrafferaufnahmen von Proteinen gemacht werden können. Für die geplanten Experimente sollte das gewünschte Mikroskop eine Bildgebungsmethode mit hoher räumlicher Auflösung bieten, um den Aufbau molekularer Komplexe im Laufe der Zeit aufzulösen
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